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抗体医薬品・診断薬開発に活用するOctetシステムによる効率的なスクリーニングアッセイ

製品カタログ

掲載内容
◆Octet System 概要
◆スクリーニングアッセイ ワークフロー
◆スクリーニングアッセイ実例

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このカタログについて

ドキュメント名 抗体医薬品・診断薬開発に活用するOctetシステムによる効率的なスクリーニングアッセイ
ドキュメント種別 製品カタログ
ファイルサイズ 4.1Mb
登録カテゴリ
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このカタログの内容

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Octet 2020/11/17
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Agenda Octet System 2
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Agenda Octet System 3
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Association AB A A Y Y B B YY Y Y Y Dissociation A: B: AB: Time Kon Kon: Kdis A + B AB Kdis Kdis: KD = Kon KD: ▪ 4 Binding (nm)
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ELISA ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ 5
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Real-Time Kinetics Improvements Over ELISA Techniques ▪ KD Association Dissociation KD = Affinty Example A 1.00E+04 1.00E-02 1.00E-06 Example B 1.00E+02 1.00E-04 1.00E-06 ▪ Octet KD Kon Kdis ELISA ▪ ELISA 6
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Over 1000 screening samples! high-throughput screening by BLI Octet HTX 7
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The ForteBio Octet Systems Octet RED Series Analyte MW: > 150 D KD range: 1 mM - 10 pM K2 RED96e RED384 Octet QK Series Analyte MW: > 5 kD HTX KD range: 10 mM - 1 nM QKe • 2-channel • 8-channel • 16-channel • 96-channel read head • 96-well plates • 96-well plates • 96 & 384-well plates • 96 & 384-well plates • >180µL assay vol. • >180µL assay vol. • >40µL assay volume • >40µL assay volume • Automation Compatible • Automation Compatible ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ ◆ m m 8
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Dip and Read 9
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Bio-Layer Interferometry (BLI) 10
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(BLI: Bio-Layer Interferometry) 100% 0 Distance Wavelength (nm) between the two reflecting surfaces = ℓ Intensity λ =ƒ(λ, ℓ) Function of density and optical thickness Time 11 nm shift Relative Intensity
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Dip and Read 12
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Breakthrough Technology: User-Selectable Read Head 8 or 16 sensors – RED96/384 sensitivity 32 or 48 sensors – QK384 sensitivity 96 sensor – QK384 sensitivity 13 13
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Model Channel Plate Sample volume Robot 8, 16 HTX 32, 48, 96 96 or 384 well 40 mL / well RED384 8, 16 96 or 384 well 40 mL / well RED96 8( 96 well 200 mL / well <Robot > 14
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Octet ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ 15
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Octet ELISA ▪ pH ▪ ▪ KD Kon, Koff 16
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Agenda Octet System 17
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Octet 18
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Applications in Lead Screening Workflow 1o • Binding to target protein (yes/no) >1,000s mAbs SCREEN • Off-rate Ranking 2o • Epitope Binning 500-1000 mAbs SCREEN • Functional or Cell-based Assays 3o • Affinity Ranking SCREEN • Concentration ~100-200 mAbs • Concentration (small scale-up) HIT TO LEAD • Ligand Binding Activity SELECTION ~50 mAbs • FcRN/FCg Binding LEAD • Kinetic Characterization OPTIMIZATI ~5-10 mAb Lead ON • Epitope Mapping Final leads <10 19
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Octet Octet RED96e Octet RED384 Octet HTX # Channels per Read 8 16 96 Molecular Weight Range > 150 Da > 150 Da > 150 Da Microplate Positions 1 2 2 Robot Compatible No Yes Yes Sample Vessel Formats 96 96 / 384 96 / 384 Minimum Sample 180 µL per well 40 µL per well 40 µL per well Volume Affinity range 1 mM to 10 pM 1 mM to 10 pM 1 mM to 10 pM (approximate) Throughput (96 samples 30 min 15 mim 2 min quantitation) Throughput (96 samples 3 h 40 min (need 1 h 50 min 18 min kinetics koff screening) plates replace) 20